<label id="zki8z"></label>
    <label id="zki8z"><meter id="zki8z"></meter></label>
    <span id="zki8z"><optgroup id="zki8z"></optgroup></span><label id="zki8z"><meter id="zki8z"></meter></label>

      <label id="zki8z"></label>

      服務熱線

      15021010459
      新聞中心
      當前位置:主頁 > 新聞中心 > 細胞適應干細胞無血清培養基的方法

      細胞適應干細胞無血清培養基的方法

      更新時間:2015-09-23 點擊次數:1633
           血清仍是動物細胞培養中zui基本的的添加物,尤其是在原代培養或者細胞生長狀況不良時,常常會先使用有血清的培養液進行培養,待細胞生長旺盛以后,再換成無血清培養液。細胞轉入無血清培養基培養要有一個適應過程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無血清培養。在降低過程中要注意觀察細胞形態是否發生變化,是否有部分細胞死亡,存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。在實驗后這些細胞一般不再繼續保留,很少有細胞能夠長期培養于無血清培養基而不發生改變的。
          干細胞無血清培養基采用經過優化的配方配制,不含血清,無異源動物成分,且化學成分明確。適用于多種人來源間充質干細胞的培養。經驗證,在S&XFM-CDTM間充質干細胞無血清培養條件下,間充質干細胞能快速生長,且能有效的維持間充質干細胞的形態、表型和分化能力。
         

      細胞適應干細胞無血清培養基的方法:

          1.直接適應——細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基(SFM)中。
          一些類型細胞可直接從包含血清的培養基適應無血清培養基。對于直接適應,接種細胞密度應該:2.5×10~3.5×10細胞/ml。當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml時,傳代培養細胞。當細胞密度在培養4到7天后達到2×10~4×10細胞/ml時,細胞*適應了無血清培養基。每隔3~5天,當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了無血清培養基的細胞培養物應該再次傳代培養。
          2.連續適應——分好幾步把細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基(SFM)中,與直接適應相比較,連續適應趨向對于細胞更加溫和一些。
          (1)以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養物到75%有血清培養基:25%SFM 混合培養基中,傳代培養。
          (2)當細胞密度>5×10細胞/ml時,以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,在有血清培養基:SFM為50∶50的混合培養基中傳代培養。
          (3)以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,25%有血清培養基和75% SFM中傳代培養。
          (4)當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml(接種后4到6天),在100%SFM培養基中傳代培養。
          (5)每隔3到5天,當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了無血清培養基的細胞培養物應該再次傳代培養。
          建議備份前一次混合培養的培養物,直到每一次細胞適應了新的混合培養基。每一次減少血清前,可能需要在SFM/有血清混合培養基中進行幾次傳代。
          在適應過程中,不要讓細胞生長過度。這將增加選擇亞群的可能性。需要注意,與有血清培養基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白質,因而更易于受外界因素的影響。
          細胞培養適應替代血清:許多細胞利用連續適應方法能很好的適應,用包含FBS的的培養基和包含有替代血清的培養基1∶1(v∶v)的混合培養基培養細胞。通過下列的混合培養基的方式,連續幾代減少當前培養基的量:1∶2,1∶4,1∶16和100%替代培養基。每次適應改變血清比例時,傳代細胞2到3次。
          培養可以直接從FBS轉換到替代血清。一開始就使用相同于FBS的濃度的替代物或血清,生長的延遲可能會發生,4允許進行2到3次的傳代,使生長率恢復到以前的水平。
          特別需要強調的是:配制無血清培養液必須使用高質量的水,如石英玻璃蒸餾器經三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為無血清培養基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子,既便水中的有毒物質含量甚微,也可能對細胞產生致死性損害。這是無血清培養能否成功的關鍵因素之一。
       

      2025 版權所有 © 重慶市華雅干細胞技術有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術支持:化工儀器網

      地址:重慶市江北區金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

      重慶市華雅干細胞技術有限公司主要經營干細胞研究 干細胞治療產品 生物試劑 實驗耗材 藥物研發等產品。

      關注我們

      服務熱線

      400-021-2200

      掃一掃,關注我們

      主站蜘蛛池模板: 国产一级a毛一级a看免费视频 | 97性无码区免费| 免费无码又爽又黄又刺激网站| 中文字幕在线观看亚洲| 亚洲欧洲日本在线| 免费无码看av的网站| 中文字幕天天躁日日躁狠狠躁免费| 爱情岛论坛免费视频| 亚洲熟女www一区二区三区| 亚洲国产一区二区三区青草影视| 亚洲高清无码专区视频| 女人让男人免费桶爽30分钟| **一级毛片免费完整视| 日本免费久久久久久久网站| 皇色在线免费视频| 一级特级女人18毛片免费视频| 豆国产96在线|亚洲| 亚洲日韩中文字幕一区| 亚洲乱码卡一卡二卡三| 亚洲尹人香蕉网在线视颅| 久久精品亚洲视频| 亚洲精品乱码久久久久久久久久久久 | 亚洲中字慕日产2021| 久久亚洲私人国产精品| 亚洲av永久无码精品漫画| 国产成人亚洲综合| 亚洲欧洲精品成人久久曰影片| 亚洲高清国产拍精品青青草原| 免费在线观看黄色毛片| 亚洲 小说区 图片区 都市| 国产zzjjzzjj视频全免费| 国产成人一区二区三区免费视频| 在线观看免费毛片| 夜夜嘿视频免费看| 暖暖免费高清日本中文| 国产精品免费_区二区三区观看| 永久久久免费浮力影院| 国产乱人免费视频| 亚洲精品WWW久久久久久 | 高潮毛片无遮挡高清免费| 另类专区另类专区亚洲|