Lonza支原體檢測(cè)試劑盒的操作步驟

對(duì)于Lonza支原體檢測(cè)試劑盒的操作使用，小編發(fā)現(xiàn)許多人都還不是很了解該如何正確的操作，今天呢小編就給大家講一下Lonza支原體檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)操作步驟吧

Lonza支原體檢測(cè)試劑盒操作步驟： 

貼壁細(xì)胞：1.被檢細(xì)胞接種于無(wú)菌的6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，接種密度為1-2×104。同時(shí)，接種正常無(wú)支原體感染的同種細(xì)胞，作為陰性對(duì)照。2.5天后，先吸去培養(yǎng)液，再加入1ml的固定液，靜置20min，3.吸去固定液，晾干。4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞），37℃避光放置15-20min或室溫靜置20～30min。5.吸去Hoechst 33258工作液，加入2ml滅菌超純水洗滌三次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封片液，并以蓋玻片覆蓋。6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周?chē)欠裼兴{(lán)色熒光小點(diǎn)或串珠狀熒光小點(diǎn)。

懸浮細(xì)胞：1.收集需檢測(cè)的細(xì)胞，1500rpm，5min。2.將收集的細(xì)胞涂片于載玻片上，再加1ml的固定液，靜置20min。3.吸去固定液，晾干。4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞），37℃避光放置15～20min或室溫靜置20～30min。5.吸去Hoechst 33258工作液，用無(wú)菌水洗滌玻片3次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封固液，并以蓋玻片覆蓋。6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周?chē)欠裼兴{(lán)色熒光小點(diǎn)或串珠狀熒光小點(diǎn)。結(jié)果判斷（參考）：陰性：僅見(jiàn)細(xì)胞的細(xì)胞核呈現(xiàn)黃綠色熒光。陽(yáng)性：除細(xì)胞外，細(xì)胞周?chē)梢?jiàn)大量的大小均一的熒光著色顆粒。

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